程颖：循环巨噬细胞在小巨噬细胞肺癌临床研究中的进展

反转细胞会( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检骨骸”，已在移转到性乳卵巢癌、癌和结肝癌里面用于临床研究表现评分。小细胞会癌症(Small celllung cancer，SCLC)其组织骨骸来源太低，且缺乏有效地的监控病情恶化移转到和预测临床研究表现的生物遥相呼应。近年来研究成果者CTCs在SCLC里面的临床研究分析分析方国法同步进行了聚焦性研究成果，断定CTCs对SCLC的病人、分期，监控病情恶化、移转到，审核、临床研究表现以及建立个体化治疗方案等有着最主要本质，本文就CTCs在SCLC临床研究分析分析方国法里面的研究成果进展不作研究成果。

一、SCLC病患CTCs的测定分析方国法

CTCs的测定分析方国法主要有流式细胞会测定高效率( fluocytometry，FCM)、逆转录一蛋白酶链底物(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch种系统、CTC芯片(CTC-chip)高效率和膜滤过分离细胞会高效率(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其里面CellSearch种系统因其半自动化的操作的平台，较高的特异性、持续性和可重复性，沦为最常分析分析方国法的CTCs测定分析方国法。

早在2004年，Allard等率先分析分析方国法CelISearch国法测定了99亦然癌症（仍未列举SCLC亦然数）病患的CTCs，随后Nagrath等运用于CTC-chip国法测定了55亦然癌症病患骨骼肌鲜血C TCs。2009年以后的研究成果多运用于CeIISearch国法测定SCI．C病患骨骼肌鲜血CTCs，然而该分析方国法由于对缺乏上皮细胞会特征的细胞会会出现漏检不太可能，且与免疫磁珠及HIV混合的CTCs无国法行某些后续的测定，临床研究分析分析方国法受到限于。

近年来，随着固态科技的发展，真核生物表达CTCs表面遥相呼应的特异性识别分f标记的固态材料混合薄流控高效率的CTCs测定的平台的研究成果受到广泛应用关注，2013年，《共存》（Nature）新闻周刊将CTCs固态测定选为最具创新性和转换成潜力的病人新分析方国法，成果最让人瞩目。但就目前来看，既有的CTCs测定分析方国法各有利弊，仍未见研究成果表明哪种分析方国法对SCLC的CTCs测定越来越有优势。着眼下一代，亟才可共同开发特异性、持续性越来越大的CTCs测定高效率，为SCLC的基础和临床研究研究成果带来有所突破。

二、CTCs在SCLC临床研究分析分析方国法里面的研究成果长期以来

（一）CTCs除此以外与SCLC的病人、分期

近年来多项研究成果显示CTCs除此以外总体与SCLC的病人、分期有紧密关系0 2009年Tanaka等分析分析方国法CeIISearch国法测定了1 50亦然7.5ml骨骼肌鲜血CTCs，其里面癌症1 25亦然、非恶性25亦然，癌症病患包含116亦然非小细胞会癌症(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9亦然SCLC。

研究成果结果显示SCLC病患CTCs阳性率为66.70-/0（6亦然／9亦然），明显较低NSCLC病患的CTCs阳性率(卵巢癌25.9%，鳞癌40.9%；卵巢癌对比SCLC，P

同年，Hou等分析分析方国法CeIISearch国法测定了50亦然初治的SCLC病患骨骼肌鲜血CTCs，包含20亦然限于期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病患和30亦然广泛应用期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病患，曲率半径期ED-SCLC及LD-SCLC病患的里面位CTCs除此以外共有237和2个/7.5ml鲜血，7亦然仍未检出CTCs的病患均为LD-SCLC，证明CTCs除此以外总体与SCLC分期系统性。

相像的结论在2012年被日本兼修者Naito等表明，研究成果者在51亦然SCLC病患里面立用CeIISearch国法测定曲率半径期CTCs总体，结果显示ED-SCLC,病患的里面位CTCs除此以外为9.5个f 7.5ml鲜血，而LD-SCLC仅为1个／7.51111鲜血，有利于证明ED-SCLC病患的CTCs总体较低LD-SCLC病患。

（二）CTCs审核SCLC的及临床研究表现

CTCs是否可作为审核SCLC和临床研究表现的有救指f,匙研究成果者们一直在揭示的关键问题。Houi等在2009年通过CellSearch国法测定了50亦然SCLC病患(LD-SCLC20亦然，ED-SCLC30亦然)的CTCs，断定CTCs>300个/7.5ml鲜血的病患及CTCs

曲率半径期CTCs>=50和

在该研究成果里面SCLC病患的临床研究表现指明数值基本上8个/7.5ml鲜血，以此将病患分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年同样分析分析方国法CellSearch国法测定59亦然SCLC病患在曲率半径期、1周期性放射治疗后及4周期性放射治疗落幕后外固鲜血CTCs总体，其里面ED-SCLC病患38亦然，LD-SCLC病患2 1亦然c曲率半径期有43亦然病患(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml鲜血，CTCs>215个/7.5ml鲜血和CTCs

经过1周期性放射治疗后病患CTCs总体明显降低，且1周期性放射治疗后CTCs

研究成果者推断CTCs总体是SCLC临床研究表现的独立影响表征，其里面1周期性放射治疗后CTCs总体是SCLC和临床研究表现最强的预测表征。

2013年ASCO发表的ECOG1508研究成果里面，研究成果者尝试在155亦然ED-SCLC里面加入真核生物表达治疗，并对其里面123亦然病患曲率半径期CTCs同步进行测定，结果显示真核生物表达治疗仍未能延长ED-SCLC病患的PFS和OS，但断定曲率半径期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml鲜血的mPFS共有4.4和4.3个年末（P=0.07），OS共有10.7和7.2个年末(P=0.01)。研究成果者认为虽然真核生物表达治疗没能提高ED-SCLC病患的PFS和OS，但却断定了CTCs不太可能是SCLC病患的临床研究表现遥相呼应。

早先，Igawa等尝试分析分析方国法OBP-401试验测定SCLC病患骨骼肌鲜血CTCso分析分析方国法OBP-401试验测定乳卵巢癌和肺癌病患CTCs的系统性研究成果已是前期路透社。研究成果纳入30亦然韧治的SCLC病患，29亦然病患(96%)骨骼肌鲜血CTCs阳性。在曲率半径期，21亦然病患CTCs

（三）CTCs监控SCLC的病情恶化和移转到

既有的研究成果表明通过测定CTCs的出现来监控SCLC的病情恶化和移转到有着最主要的临床研究本质o Tanaka等研究成果断定CTCs总体‘j 125亦然癌症病患（包含9亦然SCLC病患）进展明显系统性，特别是与周围移转到紧密（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，作者认为CTCs可作为监控癌症周围移转到的生物标记物。Natio等研究成果断定SCLC在曲率半径期、治疗落幕后及病情恶化后CTCs的阳性率共有68.6%、26.5%和67.6，提示SCLC病情恶化后骨骼肌兼修CTCs总体升高，发生周围移转到人体内的最少为0、1和>=2的病患其里面位CTCs除此以外共有2.0、7.5和21个/7.5ml鲜血,提示CTCs总体与周围移转到人体内的最少有关，周围移转到越多，CTCs除此以外越大（p

三、CTCs在SCLC临床研究分析分析方国法里面的聚焦正向

病情恶化和移转到是所致病患治疗失败和死亡的主要主因，幸而的病情恶化和移转到并采敢更进一步有效地的治疗举措可明显提高病患穴居率。然而，由于SCLC缺乏能够监控病情恶化和移转到的生物遥相呼应，且常规影像兼修检查无国法断定薄移转到灶及或多或少湿气病灶，所致发生病情恶化和移转到的SCLC病患不可及时接受病人和治疗。

临床研究里面之外LD-SCLC的病患临床研究表现相异较大，提示有些限于期的病患在病人时不太可能已发生了影像兼修不可断定的薄移转到而沦为潜在的广泛应用期病患。通过测定骨骼肌鲜血CTCs的出现及最少推移从而对SCLC病患鲜血液状态同步进行实时、高效率地监控和评分，幸而的病情恶化、移转到，将有助于临床研究医生对治疗时机的把握和治疗策略的选项，但究竟CTCs的最少或推移数值为多少时能够可靠解读SCLC的病情恶化或移转到尚不明确，才可要越来越多的循证医兼修证据不作支持。

CTCs在审核SCLC病患治疗方面的分析分析方国法尚处于聚焦下一阶段，治疗过程里面CTCs最少的推移与SCLC病患放射治疗的不确定性及其与SCLC病患前列卵巢癌时机的选项等关键问题在下一代才可大量的临床研究研究成果。近5年，对CTCs是否可作为SCLC病患临床研究表现指标的研究成果日渐增多，但SCLC最佳的临床研究表现CTCs指明数值尚无定论，争议颇多。

其里面3项来自Hou、Naito、Hiltermann的研究成果将SCLC的临床研究表现CTCs揾定数值分别基本上为50、8和2个／7.5ml鲜血，相异很大，这不太可能与研究成果运用于的统计兼修分析方国法不尽相同以及入组样本量较少有关。早先意大利兼修者Normanno等鼓吹将ED-SCLC和LD-SCLC病患分开研究成果，对曲率半径期、l周期性放射治疗后CTCs以及治疗前后CTCs的推移数值分别基本上临床研究表现指明数值，为下一代的研究成果共享了在此之后思路。笔者所在的科研人员一个团队也正致力于我国SCLC病患临床研究表现最佳CTCs指明数值的研究成果，结果最让人期待。

的个体化治疗是治疗模式的发展正向。SCLC病患对放射治疗制剂的底物存在明显的譬如说，其主要主因不太可能与十分复杂的异质性、真核生物表达相异及多态性有关。所以，逐步清晰SCLC的真核生物组兼修特征对借助确实本质上的SCLC个体化治疗尤为最主要。早先我国兼修者王洁等研究成果高效率人员通过分析分析方国法单细胞会真核生物化学合成手段对病患单个CTC同步进行正因如此真核生物组、外显子真核生物组化学合成。

在此项研究成果里面，谢晓亮教授发明的多重退火和环化反转的缩减高效率(MAIBAC)，成功借助了对病患骨骼肌鲜血单个CTC的正因如此真核生物组缩减和深度化学合成，在单个细胞会总体探测正因如此真核生物组真核生物拷贝数变异(CNVs)和单核苷酸变异(SNVs)o单细胞会总体CTCs真核生物组化学合成高效率可及时共享如致病真核生物突变等个体化治疗所才可的最主要接收者，同时也为下一代SCLC真核生物表达制剂的共同开发共享高效率支持。

SCLC其组织骨骸难以获取，上限了后续各项检查研究成果的同步进行，而利用CTCs紧密混合的SCLC反转细胞会移植瘤( CTC-derived explants，CDXs)模型，月内克服这一棘手课题。早先，Hodgkinson等尝试将6亦然ED-SCLC病患lOml骨骼肌鲜血里面的CTCs提取后注射到免疫缺陷血清皮肤上，结果在4只血清身上逐步形成了CDXs，证明SCLC病患的CTCs有着致瘤性。

同时分析分析方国法CelISearch国法测定这6亦然SCLC病患的CTCs，结果显示成功逐步形成CDXs的4亦然病患的CTCs除此以外均>400个／7.5ml鲜血，而另外2亦然仍未逐步形成CDXs的病患其CTCs除此以外共有222和20个／7.5ml鲜血，提示SCLC的CTCs致瘤性与骨骼肌鲜血CTCs教量有关。有利于分析断定比起于放射治疗持续性SCLC，放射治疗致病性SCLC病患的CDXs大大减少时间略长、生长越来越迅速。对3亦然CDXs给以顺铂和依托泊苷放射治疗制剂，其持续性顺序为CDX3>CDX2>CDX4，相应病患的OS共有9.7.3.5.0.9个年末，提示对CDXs同步进行灌注药敏试验可以间接底物病患穴居时间。

该研究成果显示之外SCLC的骨骼肌鲜血CTCs有着干细胞会功用，可同步进行灌注培养、逐步形成与原发高度相像的CDXs，为SCLC病患的灌注药敏试验、致病功能分析等一系列检查研究成果共享了足量的其组织，克服了SCLC病患骨骸来源太低的关键问题。

结论

从现行的研究成果可以显露出，虽然CTCs在SCLC里面的临床研究分析分析方国法仍处于聚焦下一阶段，但期望广阔。目前，诸多转换成性研究成果正在同步进行里面，相信随着研究成果的不断深入，CTCs月内沦为SCLC的有所突破口，期待CTCs在SCLC的领域里面为我们带来惊喜。

校对： 雪